PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

The objective of this study was to evaluate the adherence to and invasion of HeLa cells by Campylobacter spp. strains (total n=63) isolated from chickens (n=4), dogs (n=4), non-human primates (n=16), pigs (n=9), calf feces (n=18), and bovine genital tracts (n=12). Thirty-two strains adhered to and 13 invaded HeLa cells. Invasive strains included 1 of 4 dog isolates, 4 of 16 non-human primate isolates (2 C. jejuni and 2 C. coli), 1 of 9 C. coli strains isolated from pigs, and 7 of 18 C. fetus subsp. fetus isolated from calf feces. Only 25% of chicken and dog isolates and 23% of pig isolates were able to adhere to HeLa cells, a property of 65% of strains obtained from calf feces and 83% of bovine genital tract-isolated strains. The adherent phenotype was observed in 5 of 19, 6 of 15, and 21 of 29 strains of C. jejuni, C. coli, and C. fetus subsp. fetus, respectively, whereas 3 of 19, 3 of 15, and 7 of 29 strains were additionally able to invade HeLa cells, respectively. C. jejuni, C. coli, and C. fetus subsp. fetus strains isolated from animal feces are able to adhere and invade HeLa cells, whereas C. fetus subsp. fetus strains isolated from the bovine genital tract were not invasive in HeLa cells. The present study showed that C. jejuni isolated from primates and dogs, C. coli isolated from non-human primates and pigs, and C. fetus subsp. fetus isolated from calf feces have the ability to adhere to and to invade HeLa cells. Moreover, the lack of invasive ability by C. fetus subsp. fetus strains isolated from the bovine genital tract could be important in the pathogenesis of the genital tract diseases caused by this bacterium.

• Adherence invasion HeLa cells Campylobacter spp. chicken dogs swine cattle domestic animals non-human primates

Abstract in Portuguese:

O objetivo deste estudo foi avaliar a adesão e invasão de células HeLa por amotras de Campylobacter spp. (total n=63) isoladas de frangos (n=4), cães (n=4), primatas não-humanos (n=16), porcos (n=9), fezes de bezerros (n=18), e trato genital de bovinos (n=12). Trinta e duas amostras foram capazes de aderir e 13 invadiram células HeLa. As amostras invasivas incluíram 1 de 4 isolados de cão, 4 de 16 isolados de primatas não-humano (2 C. jejuni e 2 C. coli), 1 de 9 C. coli isoladas de porcos e 7 de 18 C. fetus subsp. fetus isoladas de fezes de bezerros. Apenas 25% dos isolados de frango e de cão e 23% dos isolados de suínos foram capazes de aderir a células HeLa, propriedade exibida por 65% das cepas obtidas a partir de fezes de bezerros e por 83% das amostras isoladas de trato genital bovino. O fenótipo aderente foi observado em 5 de 19, 6 de 15 e 21 de 29 amostras de C. jejuni, C. coli e C. fetus subsp. fetus, respectivamente, enquanto que 3 de 19, 3 de 15 e 7 de 29 amostras foram adicionalmente capazes de invadir as células HeLa, respectivamente. Amostras de C. jejuni, C. coli e C. fetus subsp. fetus isoladas de fezes de animais foram capazes de aderir e invadir as células HeLa, enquanto amostras de C. fetus subsp. fetus isoladas a partir de amostras de trato genital bovino não foram invasivas, em células HeLa. O presente estudo mostrou que amostras de C. jejuni isoladas de primatas não-humanos e cães, C. coli isoladas de primatas não-humanos e porcos, e C. fetus subsp. fetus isolados a partir de fezes de bezerros foram capazes de aderir e invadir células HeLa. Além disso, a falta de capacidade invasiva de amostras de C. fetus subsp. fetus isoladas de trato genital bovino pode ser importante na patogênese das doenças das vias genitais causadas por esta bactéria.

• Aderência invasão células HeLa Campylobacter spp. frangos cães suínos bovinos animais domésticos primatas não-humanos

Abstract in English:

ABSTRACT.- Xavier D.B., Rosa A.H., Sena H.S., Teixeira D.S., Tomaz C. & Titze-de-Almeida R. 2010. Absence of intestinal colonization by vancomycin-resistant enterococci in nonhuman primates. Pesquisa Veterinária Brasileira 30(6):491-496. Microbiologia Molecular e Biotecnologia, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Cx. Postal 04508, Brasília, DF 70910-900, Brazil. E-mail: ricardo.titze@hotmail.com The animal reservoirs of vancomycin-resistant enterococci (VRE) have important role in the epidemiology of the bacteria and resistant genes. The present work searched fecal samples taken off nonhuman primates for the presence of VRE. Resistance profiles, virulence traits, and genetic variability among enterococci isolates were also analyzed. The samples included Capuchin monkeys (Cebus apella, n=28) and Common marmoset (Callithrix penicillata, n=37) housed in the Primate Center of the University of Brasília, Brazil. Most individuals were captive monkeys from the Central-West and South-East regions of Brazil (n=48). We collected rectal swabs and carried out selective isolation followed by multiplex Polymerase Chain Reaction (PCR) to identify species and resistance genes. No vanA or vanB-containing enterococci were found. The carriage rates ranged from 1.5% for the VanC-type E. casseliflavus and E. gallinarum until 12.3% (n=8) for Enterococcus faecalis. All E. faecalis isolates showed susceptibility to vancomycin, teicoplanin, ampicillin, gentamicin, and streptomycin. The virulence genes ace and esp were prevalent (100.0%, 87.5%). Multilocus variable number of tandem repeats (MLVA) revealed diversity in the number of repeats among E. faecalis isolates and targets, which was higher for espC, efa5, and efa6. We identified six different MLVA genotypes that were divergent from those described in human beings. Also, they were clustered into two genogroups that showed host-specificity for the species Cebus apella or Callithrix penicillata. In conclusion, no vanA- or vanB-containing enterococci were found colonizing those primate individuals. This finding suggested that the primate individuals investigated in our study are not directly involved in the epidemiological chain of high-level vancomycin-resistant genes vanA or vanB in Brazil. Our study also showed that E. faecalis isolated from nonhuman primates carry virulence traits and have ability to spread their lineages among different individuals.

• Enterococcus vancomycin-resistance monkey vancomicina macacos

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Xavier D.B., Rosa A.H., Sena H.S., Teixeira D.S., Tomaz C. & Titze-de-Almeida R. 2010. Absence of intestinal colonization by vancomycin-resistant enterococci in nonhuman primates. [Ausência de enterococos resistentes à vancomicina na microbiota intestinal de primatas não-humanos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 30(6):491-496. Microbiologia Molecular e Biotecnologia, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Cx. Postal 04508, Brasília, DF 70910-900, Brazil. E-mail: ricardo.titze@hotmail.com Os reservatórios animais de Enterococos Resistentes à Vancomicina (VRE) têm um importante papel na epidemiologia destas bactérias e dos respectivos genes de resistência. O presente estudo examinou a presença de VRE em amostras fecais obtidas de primatas não-humanos. Foram analisados os perfis de resistência, as características de virulência e a variabilidade genética dos isolados. A amostragem incluiu macacos Prego (Cebus apella, n=28) e Sagüis do cerrado (Callithrix penicillata, n=37) alojados no Centro de Primatologia da Universidade de Brasília, Brasil. A maioria dos indivíduos amostrados foram macacos apreendidos na região Centro-Oeste e Sudeste do Brasil (n=48). Assim, foram coletados swabs retais e realizado o isolamento seletivo, seguido da Reação de Polimerização em Cadeia (PCR) multiplex para identificar espécies e genes de resistência. Não foram isolados enterococos contendo os genes vanA ou vanB. A porcentagem de enterococos variou de 1,5% para E. casseliflavus e E. gallinarum VanC até 12,3% (n=8) para Enterococcus faecalis. A totalidade dos isolados da espécie E. faecalis demonstrou sensibilidade aos antimicrobianos vancomicina, teicoplanina, ampicilina, gentamicina e estreptomicina. Os genes de virulência ace e esp foram prevalentes (100%, 87.5%). A análise em multilocus de repetições em tandem de número variável (MLVA) revelou diversidade no número de repetições entre os isolados de E. faecalis, que foi mais alta para espC, efa5 e efa6. Foram identificados seis diferentes genotipos de MVLA, divergindo daqueles já descritos em humanos. Os genotipos foram ainda agrupados em dois genogrupos, demonstrando especificidade de hospedeiro para as espécies Cebus apella ou Callithrix penicillata. Concluindo, não foram isoladas linhagens de enterococos contendo os genes vanA ou vanB colonizando as espécies de primatas analisadas. O presente estudo demonstrou que os isolados de E. faecalis obtidos de primatas não-humanos apresentam determinantes de virulência e possuem a habilidade de disseminar linhagens entre diferentes indivíduos.